兔場(chǎng)實(shí)驗(yàn)室細(xì)菌培養(yǎng)技術(shù)(2)

2017-07-29

高壓滅菌好的營(yíng)養(yǎng)瓊脂融化后,冷卻至55-60℃時(shí)加人脫纖維血液,注意必須確保無(wú)菌操作,加入血液后輕輕搖動(dòng),不使產(chǎn)生氣泡,立即倒人無(wú)菌平皿或分裝于滅菌試管中備用。

③用途:觀察細(xì)菌的溶血情況,有些細(xì)菌的初次分離時(shí)需要此種培養(yǎng)基。

(5)厭氧肝片肉湯:

①材料:營(yíng)養(yǎng)肉湯,動(dòng)物肝塊或肉渣,液體石蠟。

②方法:利用作肉湯的碎肉塊、肉渣或者是動(dòng)物肝臟少許,分裝于試管中加營(yíng)養(yǎng)肉湯5毫升,上層加液體石蠟0.5-1.0毫升.120℃20分鐘滅菌備用。

③用途:厭氧菌的培養(yǎng)。

(6)麥康凱瓊脂:

①材料:麥康凱瓊脂粉38克,蒸餾水1000毫升。

②方法:將麥康凱瓊脂粉加入蒸餾水中,攪拌浸泡1小時(shí),加熱使充分溶解,高壓滅菌備用。

③用途:常用作大腸桿菌類細(xì)菌的分離培養(yǎng)。

2.細(xì)菌接種方法

(1)平板劃線接種法:平板劃線接種法是細(xì)菌分離培養(yǎng)中最常用的方法,能使細(xì)菌分散生長(zhǎng),形成單個(gè)菌落。左手持培養(yǎng)皿,用拇指、食指及中指將平皿揭開(kāi),角度不要超過(guò)20度,右手拿接種環(huán),接種環(huán)與瓊脂表面約呈45度角。取少許病料涂布于培養(yǎng)基邊緣,火焰滅菌接種環(huán),冷卻后輕觸培養(yǎng)基邊緣的病料區(qū),并向一邊劃出橫線,可以連續(xù)劃出一個(gè)小區(qū),火焰滅菌接種環(huán),冷卻后將平皿轉(zhuǎn)換角度,從第一個(gè)小區(qū)再向外劃出一個(gè)小區(qū),以后再按照同樣方法分區(qū)將平板劃滿,注意只能在起始部位與前一個(gè)小區(qū)交叉。

(2)瓊脂斜面接種法:本方法多用于菌種的保存,也可以用于細(xì)菌的分離。左手持斜面培養(yǎng)基,右手持接種環(huán),火焰滅菌冷卻后挑取所需的菌落,以右手小拇指夾住棉塞或膠塞,輕轉(zhuǎn)后取出,注意不要污染,立即將管口和塞子火焰滅菌,將接種環(huán)伸入試管內(nèi),自斜面底部向管口方向劃曲線,再經(jīng)火焰消毒管口和塞子后蓋嚴(yán),進(jìn)行培養(yǎng)。

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