細(xì)菌分離培養(yǎng)是兔場實(shí)驗(yàn)室診斷工作中一個(gè)十分重要的步驟，通過對(duì)細(xì)菌的分離和純培養(yǎng)，可以根據(jù)菌落的形態(tài)、大小、結(jié)構(gòu)、色澤、氣味以及有無溶血等情況進(jìn)行初步鑒定，然后通過進(jìn)一步的染色鏡檢或者是特殊培養(yǎng)進(jìn)行鑒定或研究，為病原的確診提供依據(jù)。
1．培養(yǎng)基制備培養(yǎng)基是細(xì)菌學(xué)檢查過程中非常重要的材料，它含有細(xì)菌生長所必需的營養(yǎng)物質(zhì)，細(xì)菌經(jīng)過培養(yǎng)基的純培養(yǎng)，才能夠進(jìn)行準(zhǔn)確的檢查，得到可靠的結(jié)果。
(1)肉水的制作：
①材料：瘦牛肉500克，蒸餾水(或常水)1000毫升。
②方法：取瘦牛肉除去脂肪、肌腱，切成碎塊或絞碎，按1千克牛肉2千毫升水的比例，加水浸泡一夜，煮沸一小時(shí)，用紗布初步濾去肉渣擠出肉水，再用濾紙濾過，補(bǔ)足原有水量，裝入燒瓶中置高壓滅菌器中120℃20分鐘滅菌，制成肉水。
制作肉水的另一種方法是：取牛肉浸膏0.5-1.0克，加蒸餾水100毫升，加熱溶解，濾紙濾過，并同上述方法進(jìn)行滅菌即成。
③用途：制作各種培養(yǎng)基的基礎(chǔ)。
(2)營養(yǎng)肉湯：
①材料：肉水1000毫升，蛋白胨I0克，氯化鈉5克。
②方法：將蛋白胨和氯化鈉加入肉水中，稍加熱溶解，用氫氧化鈉溶液調(diào)整pH值為7.4-7.6之間，再加溫使溶液均勻。濾過分裝后高壓滅菌備用。
③用途：可供一般的細(xì)菌生長需要，檢查細(xì)菌的生長表現(xiàn)，也可作為制作固體培養(yǎng)基的基礎(chǔ)。
(3)營養(yǎng)瓊脂：
①材料：營養(yǎng)瓊脂粉40克，蒸餾水1000毫升。
②方法：將營養(yǎng)瓊脂粉加入蒸餾水中，攪拌浸泡1小時(shí)，加熱使充分溶解，高壓滅菌備用。
③用途：分離細(xì)菌純培養(yǎng)及作為其他特種培養(yǎng)基的基礎(chǔ)。
(4)血液瓊脂培養(yǎng)基：
①材料：脫纖維血5-10毫升，營養(yǎng)瓊脂100毫升。
②方法：準(zhǔn)備好滅菌并有玻璃珠的三角燒瓶，無菌采集血液，注入三角燒瓶中，不停地?fù)u動(dòng)，直至血纖維分離為止，一般需要10分鐘。
