如何進(jìn)行葡萄無(wú)病毒組培快繁的工廠(chǎng)化生產(chǎn)

2024-01-23

用組織培養法繁殖葡萄,可達到優(yōu)良葡萄快速育苗的目的,以滿(mǎn)足生產(chǎn)需要。同時(shí)也是工廠(chǎng)化育苗和脫毒苗木快速繁殖的重要手段,并能常年進(jìn)行,縮短了苗木繁殖周期,加快新品種的推廣應用。

葡萄無(wú)病毒組培快繁的工廠(chǎng)化生產(chǎn)

(1)試管苗的初代培養

植物組織培養是無(wú)菌地培養植物的技術(shù),因此,離體進(jìn)行葡萄試管繁殖,脫除病毒,胚胎花藥和子房培養,細胞和原生質(zhì)培養,離體保存等,都必須使用無(wú)菌材料。葡萄組織初代培養,繁殖材料多取自大田,常帶有大量細菌和霉菌,必須進(jìn)行消毒方可獲得無(wú)菌材料。

材料采集在組培前3天的晴天上午,取帶腋芽的葡萄半木質(zhì)嫩莖,剪取后立即拿入室內,先用自來(lái)水反復沖洗,除去病蟲(chóng)枝、傷殘,減除大葉片,裝入廣口瓶進(jìn)行消毒。

用無(wú)菌操作技術(shù),倒入無(wú)菌水浸泡和沖洗;倒去無(wú)菌水,加入0.1%升汞浸泡材料,并劇烈搖動(dòng)6~9分鐘,剪去受傷端面,剪成單芽莖段,接入培養基中。每瓶一段,正插入內。標號后放到培養室培養,一周后檢查,如未污染,基本上不會(huì )再污染。

(2)試管苗的繼代繁殖

對初代培養合格或引進(jìn)的試管苗,一般采用ms、b5、gs等培養基。具體做法如下:

①穿好工作服,戴上工作帽,用潔凈的水洗手,再用75%的酒精棉球擦手消毒;②取無(wú)菌原種苗瓶放于超凈臺,用70%酒精棉球仔細擦拭包頭紙及苗瓶外體,并解開(kāi)包頭紙捆扎線(xiàn)繩;

③將彎剪刀、槍狀鑷子浸入75%酒精中,用時(shí)取出在火焰上燒15~30秒,晾涼備用;

④將無(wú)菌原種苗瓶的包頭紙連棉塞一同拔下,放在超凈臺一旁,瓶口在火焰上燒5~10秒,用冷卻的剪刀將瓶?jì)刃∶缂舫蓡窝壳o段,下端稍長(cháng),上端較短,但剪口距芽至少0.5厘米以上。母株基部要留一個(gè)芽,使其再發(fā)。剪下的單芽莖段,用無(wú)菌鑷子逐個(gè)夾出,放入新的培養基瓶?jì)?,并使葉子和芽露出培養基。150毫升三角瓶插5個(gè)左右莖段,插完后將瓶口在火焰上轉動(dòng)燒一圈,旋好棉塞和包上包頭紙,用繩扎好,注明品種名稱(chēng)和時(shí)間等。如此反復地接好所有苗子,并放到培養室。一般每月轉接增殖3次。

(3)試管苗的培養

將接種后的培養苗瓶,放在培養室的架上,培養室晝夜溫度保持在22~28℃,新轉接的苗瓶應放在培養架上層,上層溫度略高易于生根。相對濕度以70%為宜,光照2000~3000勒克斯。

(4)移栽

移栽多在冬季或春季進(jìn)行。

①光培煉苗。培養室培養的試管苗生長(cháng)達瓶口、有3~4枚正常葉片時(shí),根系生長(cháng)良好,連同培養瓶轉入溫室或大棚內,逐步去掉瓶塞,放在干凈的溫室中,2萬(wàn)~4萬(wàn)勒克斯的自然光下煉苗5~7天。當瓶口長(cháng)出油亮的葉片、幼莖變淡紅色時(shí)即可出瓶。

②沙培煉苗。最好備有下鋪電熱線(xiàn)并能調節溫度的沙床,使床溫維持在25℃左右,以0.6厘米間距布置電熱線(xiàn),其上鋪墊2厘米的土,壓平,再鋪8~10厘米的干凈細河沙,濕度在12%左右,即手捏成團落地能散。

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